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南京景竹生物科技有限公司

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公司动态
灯盏花素含量测定
发布时间:2014-03-12        浏览次数:577        返回列表
 方法名称:灯盏花素测定-高效液相色谱法

应用范围:该方法采用高效液相色谱法测定灯盏细心中野黄芩苷的含量。该方法适用于菊科植物短葶飞蓬的干燥全草。   
方法原理:该品加三氯甲烷于索氏提取器中提取,药渣加甲醇加热回流,取续滤液蒸干,残渣加甲醇溶解,摇匀,滤过,续滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离,用紫外吸收检测器,于波长335nm处检测野黄芩苷的吸收值,计算出其含量。   
试剂:1. 甲醇    2. 0.1%磷酸溶液  3. 三氯甲烷   

仪器设备:
  1 仪器   
       1.1  高效液相色谱仪   
       1.2  色谱柱:十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,理论塔板数按野黄芩苷峰计算应不低于5000。      1.3  紫外吸收检测器   
  2色谱条件   
        2.1 流动相:甲醇 0.1%磷酸溶液=40 60   
        2.2 检测波长:335nm   
        2.3 柱温:室温   
试样制备:
    1. 称取供试品:精密称定该品粉末0.5g,为供试品。   
    2. 对照品溶液的制备:精密称取野黄芩苷对照品适量,加甲醇制成每1mL含0.1mg的溶液。   
    3. 供试品溶液的制备:取该品粗粉约0.5g,精密称定,置索氏提取器中,加三氯甲烷适量,加热回流至提取液无绿色,弃去三氯甲烷液,药渣挥去溶剂,连同滤纸筒移入具塞锥形瓶中,精密加入甲醇50mL,密塞,称定重量,放置1小时,水浴中加热回流1小时,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液25mL,回收溶剂至干,残渣用甲醇溶解并转移至10mL量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,滤过,续滤液作为供试品溶液。   

操作步骤:
    分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各5~10mL,注入高效液相色谱仪,用紫外吸收检测器于波长335nm处测定野黄芩苷(C21H18O12)的峰面积,计算出其含量。 

参考文献:药典,国家药典委员会编,化学工业出版社,2005版,一部,p100。